细胞分离实验（组织→单细胞悬液）
用途：从组织（血管、肝脏、肿瘤、动脉粥样硬化斑块、血液）中分离出活的单细胞，用于流式、培养、分选。
一、试剂耗材
PBS（预冷）
组z消化液：胶原酶 II / IV（常用 0.1%–0.2%）
或 胶原酶 + 胰m混合消化液
细胞筛网：70 μm 或 40 μm
离心管、培养皿、剪刀、镊子
含血清培养基（终止消化）
二、标准实验流程
1. 取材
无菌条件下取出组织。
用冷 PBS冲洗，洗掉血污、脂肪、结缔组织。
剪成 1 mm³ 左右小碎块。
2. 消化（最关键）
把碎组织转入离心管，加入预热消化液，放入 37℃水浴 消化：
一般组织：30–60 min
疏松组织：20 min
致密组织（斑块、动脉）：1–2 h
期间每隔 5–10 分钟 轻轻吹打 / 颠倒 一次。
3. 终止消化
加入2–3 倍体积 含 10% 血清的完q培养基，终止消化（血清抑制酶）。
4. 过滤去残渣
用吸管轻轻吹打后，过 70 μm 细胞筛，去掉未消化的组织块，只留单细胞悬液。
5. 离心
转速：1000 rpm（≈6000 g）
时间：5–8 min
弃上清。
6. 重悬 & 计数
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