肺栓塞动物模型动物的选择
研究肺栓塞的病理生理学及影像学,实验动物主要是狗、兔等;肺栓塞的治疗研究,动物主要是大鼠、小鼠。
肺栓塞动物模型造模方法
一、家兔肺栓塞模型
家兔模型是目前较为成熟和普遍使用的,而且家兔的纤容系统比狗和猪更接近于人体的纤容系统,所以家兔模型也是目前较为理想的肺栓塞模型。
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体外血栓形成法
造模方法:造模前从耳缘静脉抽血1 mL,注入无菌瓶内静置一段时间,使其凝血制成自体血凝块,再经股静脉注入制好的血凝块,辅以NS使血凝块随血液循环运行至肺动脉并将其堵塞,建立急性肺栓塞模型。
Tips:制作急性肺血栓栓塞模型的栓子很多,包括:血凝块、明胶海绵、玻璃体球状物、α2凝血mei、胶原蛋白等。一般实验室常用血凝块。由于自体血栓的形成和临床肺栓塞症血栓的形成具有一定的相似性,故能更真实地反映疾病的病理生理改变。
二、犬肺栓塞模型
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自体血凝块法
犬的急性肺栓塞模型多用体外自体血凝块法。
造模方法:股动脉抽血80~100mL,注入到含凝血mei的玻璃器皿中,静止使其凝固,制成大小约10mm×10mm×5mm的xue块,经右颈静脉注入栓子,要维持肺动脉压在50~60mmHg,一旦低于50mmHg,需再次注入栓子,此过程持续30 min,之后稳定1h。
三、鼠肺栓塞模型
鼠模型的制备有的采用血凝块,有的用药物诱导,自体血凝块的制作与犬模型中的血凝块的制作方法相似。
栓子制作:无菌条件下从颈动脉插管取血0.5ml,迅速推入细聚乙烯导管,室温静置25~30 min凝固,推入生理盐水,制成直径约0.6~0.8 mm自体血栓。无菌手术dao切成长3~4 mm,灭菌生理盐水反复冲洗,计数约50个备用。
造模方法:腹腔注射20%乌拉坦6 ml/kg麻醉,必要时追加0.5 ml/h。沿颈前正中线做长约2cm 切口,钝性分离右颈外静脉和左颈动脉,插管分别接YP100型压力传感器,量程分别为(-10~10 kPa)和(-10~40 kPa),动态监测肺动脉压和体动脉压的变化。右颈外静脉经导管快速、反复注入已制备血栓20~30个,注栓速度0.5 ml/s,使肺动脉收缩压(sPAP)维持在40~60 mmHg之间约60 min,生理盐水冲洗以防栓子滞留于导管或颈静脉内。缝合切口,电脑记录肺动脉压和体动脉压动态变化。
造模结果:大鼠自体血栓肺栓塞模型制备的成功率约85%。注入自体血栓20~30 min后,大鼠肺动脉压明显升高。早期肺动脉压升高后很快回落,后随血栓的注入逐渐持续升高,能维持2~4 h。同时大鼠呼吸加快加深,口唇发绀,两肺出现弥漫性干湿啰音等肺栓塞体征。肺灌注扫描ECT显像,见两肺明显放射性缺损和稀疏。大体组织见肺膨胀不全,胸膜下和切面上见较多的散在出血灶。肺组织光镜观察见肺动脉内有注入的血栓团块,以淡蓝色纤维素包绕大量红细胞,可区别于肺淤血。同时见肺血管壁肌层组织水肿,大量炎症细胞浸润。
优点:采用改良右心导管法,动态监测肺动脉压变化。其较通常的股静脉注栓法具有路径短、栓子稳定、可控性强等优点。