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裸鼠皮下成瘤模型

裸鼠皮下成瘤模型

简要描述:
裸鼠皮下成瘤模型:裸鼠肿瘤模型是比较常见和常用的一种肿瘤动物模型,它在皮下移植瘤肿瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠肿瘤模型的接种一般有细胞接种和瘤块接种两种方式,接种取材有手术活检标本、癌性胸腹水标本和体外培养的细胞系三种。

更新时间:2024-01-17

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厂商性质:其他

裸鼠皮下成瘤模型动物选择

如果需要构建一个同源的肿瘤模型,应该选择相同基因的小鼠品系,如C57BL/ 6和Balb/ c,前者是广泛使用的实验室啮齿动物,因为它既健壮又容易繁殖。然而,如果需要构建异种肿瘤移植模型,则需要使用免疫缺陷小鼠。其中包括胸腺不全的裸鼠、免疫缺陷型小鼠(SCID)、 NOD /SCID等小鼠。NSG小鼠缺乏成熟的T细胞、B细胞和最自然的杀伤活性;它们在先天免疫和细胞因子信号通路中也有许多缺陷。一般来说,小鼠的免疫缺陷越严重,肿瘤移植率最高。



裸鼠皮下成瘤模型造模方法

1、细胞是贴壁细胞,细胞培养在 RPMI-1640 培养基中,含 10%胎牛血清,100U/mL 的青mei素,100ug/mL 的链mei素,培养在 37℃含 5%CO2的细胞培养箱中。
细胞传代培养:当细胞长至 80-90%时,去除培养基,加入 PBS 洗 1-2 次,去除 PBS后,加入 1ml 胰mei消化 1-3min 后,加入 3ml wan全培养基中和胰mei终止消化,将消化的细胞转移至 15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min。倒掉上清后,加入 3ml 培养基重悬细胞,1:3 传代至培养皿中培养。
2、将长到培养皿 80%-90%的细胞用胰mei消化下来,1000rpm 离心,去除上清,加入wan全培养基重悬细胞,将细胞分别种在 6 孔板中,每孔种 1×105个细胞。
3、待细胞贴壁后,按照 MOI=1:10 的比例加入慢病毒感染细胞,感染 24h 后,去除含病毒的培养基,加入wan全培养基。培养 48h 后,加入 puromycin 进行筛选。
4、将细胞进行扩增培养。待细胞长到zhi定数量时,将细胞用胰mei消化下来,1000rpm离心后,去除上清,加入 PBS 将细胞洗一遍,再次加入 PBS 重悬,对细胞进行计数,将数量调整为 2×107个细胞/ml。
5、8周龄15只裸鼠适应性饲养7天后,随机分为3组,每组分别在右腋皮下接种2×106(100ul/只)细胞(细胞分为对照组细胞即未处理的细胞,NC 组细胞即感染 NC 病毒的细胞,shRNA 细胞即感染 sh-RNA 病毒的细胞)。接种约两周后出现肿瘤结节,每周用游标卡尺测量肿瘤大小两次。将裸鼠放入鼠笼中正常饲养 4 周后处死裸鼠,取裸鼠肿瘤拍照冻存。


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