组织石蜡包埋和切片:
1、切取组织,浸泡在4%用pH7.4 BS配成的甲醛固定剂中,室温24小时。
附:4%甲醛固定剂(5ml):4.5ml 1×PBS(pH7.4)+0.5ml甲醛
2、倒掉甲醛固定剂,加pH7.4 BS,每隔8小时更换一次,4℃保存,换液共3天。
3、打开烘箱,调温至62℃,融石蜡。
4、酒精梯度脱水(30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%×2),隔30分钟更换一次。
5、50%酒精+50%二甲苯30分钟(过渡步骤)。
6、100%二甲苯,时刻观察组织块至透明。
7、放入烘箱中已经预融的50%石蜡+50%二甲苯中,30分钟。
8、100%石蜡两遍,每次2小时。(若石蜡浸润不够,仍有二甲苯,则包埋后的石蜡块较脆,易分层、断裂。)
9、100%石蜡纸盒内凝固(先用蜡打底,再放入组织块,浇上蜡包埋,放入4℃冰箱或水中冷凝,标明组织块放入方向),4℃存放备用。
10、修块。
11、融化石蜡抹于块底,贴在木块上,压实。
12、切片(5-10μm),将切片平展于平板上,光面朝上。
13、将光面朝下,将石蜡薄切片放于水面上(水温40℃),使其伸展。(时间勿太长)。
14、将石蜡薄片贴在预先处理好的玻片上。
15、40℃烘烤过夜。
上一篇: 诱导腹泻动物模型
下一篇:细胞石蜡包埋实验检测服务