MTT实验技术服务是细胞项目组成之一,该项目实验由经验丰富的人员进行操作。
MTT实验技术服务本公司实验过程所用试剂,,已实验的准备性。 如果有特殊样本,请提前说明,价格另议。
一、实验步骤
1. 细胞接种
消化细胞,制备单细胞悬液,计数。
接种到96 孔板:
每孔 1000~10000 个细胞 / 100 μL 培养基(依细胞生长速度调整)。
置于培养箱过夜,让细胞贴壁。
2. 药物 / 处理因素干预
吸去旧培养基,加入含不同浓度药物的培养基,每孔 100 μL。
每组设 3~6 个复孔,同时设:
空白孔(只加培养基,无细胞)
对照孔(细胞 + 无药培养基)
继续培养:24 h、48 h 或 72 h。
3. 加入 MTT
每孔加入 20 μL MTT 溶液(5 mg/mL),轻轻混匀,继续培养 4 h。
4. 吸出上清(关键)
小心吸掉上清,不要吸走底部甲瓒结晶。
5. 加 DMSO 溶解
每孔加入 150 μL DMSO,摇床低速振荡 10 min,使结晶完q溶解。
6. 检测
酶标仪 490 nm 波长测各孔 OD 值
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