病理切片服务介绍
常规石蜡切片:己固定好的组织,或石蜡包埋好的蜡块组织标本(常温运输) 。
冰冻切片:4%多聚甲醛固定的组织或OCT 包裹的新鲜组织(-80°C或液氮内保存,干冰运输) 。
病理类实验服务:
IHC免疫组化检测 免疫荧光 TUNEL检测 HE染色 碱性磷酸酶染色(NAP) 酸性磷酸酶染色(ACP) Masson染色 瑞士姬姆萨复合染色 油红O染色等。
病理切片完整流程(石蜡切片)
1. 取材
处死动物,快速取组织
修成:0.5×0.5×0.3 cm 左右小块
放入4% 多聚甲醛固定
2. 固定(关键)
固定液:4% 多J甲醛
时间:24~48h
目的:
防止组织自溶、保持形态、让蛋白凝固
3. 脱水
用梯度酒精把水脱掉:75%→85%→95%→100%→100%每级 30min~1h
4. 透明
酒精不能和石蜡互溶,要用二J苯过渡:二J苯 Ⅰ → 二J苯 Ⅱ至组织透明为止
5. 浸蜡
组织放入熔化的石蜡中浸透:石蜡 Ⅰ → 石蜡 Ⅱ → 石蜡 Ⅲ一般 1~2h
6. 包埋
把浸好蜡的组织放进包埋框,倒入石蜡,冷却成蜡块
7. 切片(核心步骤)
蜡块修整
用轮转切片机切片
厚度:4~5 μm
8. 展片
切片放入45℃左右温水摊片机展平、无褶皱
9. 捞片
用载玻片把切片捞起,放在 60℃左右烘片机烤片
10. 烤片
60℃ 烘片 30min~2h,使组织贴牢
11. 脱蜡至水
准备染色:二甲苯脱蜡 → 梯度酒精 → 水洗
12. 染色
13. 脱水透明封片
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