DAPI染色液，也称DAPI dihydrochloride，是一 种可以穿透细胞膜与DNA强有力结合的蓝色荧光染料，灵敏度高于EB，可产生比DAPI自身强20多倍荧光。
DAPI染色常用于普通的细胞和组织细胞核染色，也可于荧光显微镜或流式细胞仪共同用于细胞凋亡检测。
DAPI的分子式为C16H15N5•2HCI，分子量为350.25，CAS Number 28718-90-3，DAPI 的the max激发波长为340nm,the max发射波长为488nm，DAPI和双链DNA结合后,the max激发波长为364nm,the max发射波长为460nm。
DAPI 染色流程（荧光切片用）
前提：你已经做好 免疫荧光（IF）切片，一抗二抗都孵完、洗干净了，只差染核。
1. 试剂
DAPI 染色液（按说明书稀释，一般 1:1000 用 PBS 稀释）
PBS（磷酸盐缓冲液）
2. 步骤
- 洗片用 PBS 浸洗片子 3 次，每次 5 min，洗掉未结合的二抗。
- DAPI 孵育（避光！）
滴加稀释好的 DAPI 工作液，W全覆盖组织
室温、避光 孵育 5–10 min
- 洗掉多余 DAPIPBS 洗 3 次，每次 5 min，洗掉背景荧光。
- 封片滴加抗荧光淬灭封片剂，盖盖玻片。
- 保存与观察
避光保存（4℃ 可放几天）
立即用荧光显微镜观察
