腺病毒(Adenovirus)是直径约80-120 nm的无包膜的线性双链DNA病毒,可迅速感染分裂和非分裂期细胞,与细胞表面受体结合后通过内吞作用进入细胞,在细胞核孔附近聚集,并在感染后2h将腺病毒的DNA释放到细胞核中并开始蛋白表达。通过对野生腺病毒进行改造,保留包装信号序列,去除病毒蛋白的编码序列,不仅增加外源基因的装载容量,而且降低细胞毒性和机体免疫反应,从而获得安全性更高的基因导入系统。
腺病毒包装系统的特点:不整合到宿主细胞基因组、无插入致突变性、可进行有效扩增、获得高滴度高纯度的腺病毒。
腺病毒的优势
1. 是研究原代非增殖细胞基因表达的系统:腺病毒感染细胞后,1-2天即可表达,是研究原代非增殖细胞基因表达的系统。
2. 滴度高:腺病毒系统在转有E1基因的HEK293细胞中可进行自我复制,可产生滴度为1010~1011PFU/mL的病毒。
3. 载体容量大:可容纳不超过5kb的片段。
4. 不整合到染色体中,无插入致突变性:腺病毒除卵细胞以外,几乎在所有已知细胞中都不整合到染色体中,因此避免了因整合而引发的潜在的基因突变和随机效应。
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