序列分析表明,至少有1/3的人类基因与miRNA调控相关,而且越来越多的试验证据表明miRNA还有很多功能未被发现。研究基因的功能通常是将其从基因组中敲除,然后观察敲除前后的变化,但在破译miRNA的功能,我们一般不会采用这种策略,而是通过增强或减弱该miRNA的表达来鉴定其功能。
miRNA mimic能模拟细胞中内源性成熟miRNA的高水平表达,以增强内源性miRNA的调控作用,是miRNA功能研究的一大利器。miRNA mimic是一种简单高效的miRNA研究工具,只需用转染试剂包裹即可转染进入细胞,无需构建载体的繁琐操作,无需病毒防护方面的担忧,用转染对照即可观察其转染效率。
miRNA mimic的转染效果,可从靶基因的RNA表达水平,蛋白表达水平,细胞功能等方面检测。这些实验能够获得miRNA的生物学功能数据,及应用于miRNA的靶基因验证方面。通常这些实验涉及到miRNA mimic的转染,或者与报告基因载体共转。
在MEF细胞内转染miRNA表达载体(2ug/mL)或者miRNA mimic(50nM),48h后检测miRNA的表达,结果显示,表达载体仅能实现10倍的过表达,而miRNA mimic可实现600倍以上的过表达。对于短期(<1周)的miRNA功能获得性细胞研究而言,miRNA mimic是zhd选择。
从生物学机理上来说,miRNA有成为肿瘤标志物的优势,它是肿瘤细胞主动分泌的,随着肿瘤细胞的生成、凋零,miRNA的表达量一直在变化,所以每种miRNA的表达量代表了在某一刻人类体内健康或者疾病的信息。 MiRXES在人体这2000多种miRNA中,他们找出了与胃癌高度相关的12种miRNA,当人体中出现胃癌细胞时,这12种miRNA在血液中的浓度会出现异常。