本实验模型使用小鼠、大鼠、兔等动物均可造模,通过给予动物自由饮用不同浓度的DSS(MW:36000~50000)水溶液,根据用药时间及用药周期可制成急性和慢性两种结肠炎模型。该模型症状表现与人类UC极为相似,主要表现为腹泻、黏液样便、粪便潜血、肉眼血便、重量减轻、活动度减少,毛色变差等。
一、实验准备
1.实验动物:C57BL/6或BALB/c,雌性,6-8周。每组至少8-10只小鼠。
2.造模试剂:DSS,Mw 36000-50000,含硫量17-20%。
3.DSS浓度:急性期模型通常为3-5%,慢性期模型通常为1-3%;可根据实验需求及动物类型摸索浓度。该浓度为质量体积比,使用饮用水配置后,过滤除菌。
二、模型构建
慢性与急性结肠炎模型的构建时间分别为:8天与50天,使用DSS浓度为3-5%和1-3%,之后脱颈,取肠道组织,进行相应病理染色。
三、如何评价造模是否成功
1)疾病活跃指数评分:
从三个方面进行评估打分,分别为体重、粪便粘稠度、粪便潜血等指标。
2)组织学变化评分:
a)溃疡形成个数;
b)上皮细胞变化;
c)炎症浸润;
d)淋巴结形成;
组织学分析的标准方法为HE染色。
3)结肠长度:
急性结肠炎模型中,第8天可检测到结肠长度缩短;慢性结肠炎模型中,结肠长度缩短更加明显。