• 技术文章ARTICLE

    您当前的位置:首页 > 技术文章 > 3-4周龄雌性大鼠卵巢颗粒细胞的原代培养

    3-4周龄雌性大鼠卵巢颗粒细胞的原代培养

    发布时间: 2024-06-28  点击次数: 107次
      1. 3-4周龄雌性SD大鼠,皮下注射孕马血清促xing腺激素(Pregnant Mare Serum Gonadotropin,PMSG) 60IU,48h后颈椎脱臼处死。
     
      2. 大鼠浸入75%乙醇浸泡5-10分钟,转移到通风柜中的解剖盘中。
     
      3. 在距离大鼠脊柱1cm、肋下1cm的交叉位置剪开皮肤、肌肉,可见白色的脂肪组织,拉出脂肪组织,可见到粉红色的卵巢,摘除卵巢。
     
      4. 取卵巢放入预冷的含双抗的缓冲液中,用缓冲液清洗卵巢三次,去除周围组织及表面包膜。
     
      5. 在解剖显微镜下用1mL的注射器刺破卵泡,释放颗粒细胞。
     
      6. 将悬液通过70μm筛网过滤至50ml离心管中,之后200g,离心7min。
     
      7. 计数,种植到24孔板和大皿中。
     
      8. FSHR表达鉴定颗粒细胞。