一、Transwell 非接触共培养
1. 材料
Transwell 小室(常见 0.4 μm 或 8 μm)
细胞 A:下室细胞(比如内皮细胞、肿瘤细胞)
细胞 B:上室细胞(比如巨噬细胞、干细胞、成纤维细胞)
完q培养基
2. 实验步骤
- 种下室细胞下室(24 孔板)接种细胞 A:每孔 3×10⁴~1×10⁵ 个,培养基 500 μL,培养过夜贴壁。
- 种上室细胞Transwell 小室中接种细胞 B:每室 2×10⁴~8×10⁴ 个,培养基 200 μL,培养贴壁。
- 开始共培养把种好细胞 B 的小室放入下室,组成:
上室:细胞 B
下室:细胞 A
放入培养箱共培养 24/48/72 h。
结束实验
取出小室,分别收集:
下室细胞:测 RNA、蛋白、荧光、功能实验
上室细胞:测迁移、侵袭、凋亡等
二、直接接触共培养(细胞混养)
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