荧光素酶检测实验原理
miRNA通过碱基配对结合到靶mRNA的3'UTR区,抑制靶基因的翻译或对靶基因mRNA的降解达到调控基因表达的目的。将靶mRNA的3'UTR区构建至萤火虫荧光素酶报告基因的3'端，与miRNA表达载体及海肾荧光素酶报告基因载体并转染细胞，先后加入两种底物荧光素，通过对荧光素酶报告基因的表达检测确认miRNA对靶基因的调控效果。
荧光素酶检测技术应用：通过miRNA靶标的鉴定，从而进行miRNA功能的深入研究。
| 实验问题 | 原因 | 推荐解决方法 |
| 发光检测值过低 | 荧光素酶表达过低 | 注意调整细胞状态、转染条件、转染量，提高发光值 |
| 检测试剂 | 避免反复冻融以及保存时间过长 | |
| 发光检测值过高 | 荧光素酶表达过高 | 建议通过降低转染量或减少检测体积等降低发光 |
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