Mallory染色
实验材料
Mallory试剂盒、95%乙醇、无水乙醇、二甲苯、中性树脂
Mallory染色过程:
1. 组织准备
固定:将组织样本固定于10%福尔马林固定液中,以保存其形态和化学成分。
脱水包埋:将固定后的组织进行常规脱水处理,然后用石蜡包埋,以便切片。
2. 切片与脱蜡
切片:使用切片机将包埋好的组织切成4μm厚的石蜡切片。
脱蜡:将切片置于一系列不同浓度的乙醇中,使石蜡逐渐溶解并脱去,最终将切片水化至水相。
3. 氧化与漂白
氧化:将切片浸入酸化gaomengsuanjia溶液中氧化一定时间(通常为5分钟),以增强组织的染色效果。
水洗:用蒸馏水或自来水轻轻冲洗切片,去除残留的gaomengsuanjia溶液。
漂白:将切片浸入草酸溶液中漂白1~2分钟,以去除多余的氧化产物,并准备进行染色。
4. 染色
PTAH染色:将切片浸入Mallory PTAH染色液(自然氧化法)中,加盖浸染24~48小时。此步骤是染色的核心,磷钨酸苏木素将与组织中的蛋白质成分结合,形成鲜明的染色效果。
5. 分色与脱水
分色:用95%的乙醇迅速洗去切片上多余的染液,此步骤需迅速进行,以避免颜色过度脱失。
脱水:将切片依次置于更高浓度的乙醇中进行脱水处理,直至无水乙醇。
6. 透明与封固
透明:使用二甲苯等透明剂对切片进行透明处理,以去除切片中的乙醇并增加其透明度。
封固:最后,用中性树胶将切片封固在载玻片上,以便长期保存和观察。
染色结果:
Mallory染色是一种在生物化学和病理学实验中常用的染色方法,特别用于结缔组织的染色。它主要用于显示胶原纤维和其他蛋白质成分,使得在显微镜下观察时,这些结构能够更清晰地呈现出来。
Mallory染色通常使用酸性品红或天青B等酸性染料,并结合磷钨酸或磷钼酸等媒染剂。这些酸性染料能够与组织中的蛋白质成分结合,而媒染剂则能增强染料的染色效果,使得染色更加鲜明和持久。
通过Mallory染色,病理学家可以更容易地观察和分析结缔组织中的胶原纤维和其他蛋白质成分,从而帮助诊断与这些结构相关的疾病。例如,在肝脏疾病的诊断中,Mallory染色可以帮助识别肝硬化时肝小叶结构的变化和胶原纤维的增生情况。
需要注意的是,Mallory染色是一种比较复杂的染色方法,需要经验丰富的技术人员进行操作。同时,染色结果也可能受到多种因素的影响,如染液的浓度、染色时间、洗涤条件等。因此,在进行Mallory染色时,需要严格控制实验条件,以确保染色结果的准确性和可靠性。