肢体缺血动物模型构建是实验平台组成之一,该实验由从事动物实验专业,经验丰富的人员进行操作。
肢体缺血动物模型构建本公司实验过程所用试剂,全部为进口试剂,已实验的准备性。
肢体缺血动物模型是进行缺血损伤机制、血管新生等研究的基础,成功制作一种效果确切、重复性强的肢体缺血模型是保证实验研究能够顺利进行的关键。当前缺血性疾病患者日渐增多,以糖尿病肢体动脉闭塞症(DAO)、闭塞性动脉硬化症(ASO)和血栓闭塞性脉管炎(TAO)为主的下肢缺血性疾病发病率逐年增加。国外资料显示,70岁以上老年人群中仅动脉硬化闭塞症患病率即可达15%~20%。而患病人群范围可覆盖至青壮年,其高发生率和广泛累及率已严重危害着人们的身心健康和生存质量,亟待探索其发生机制、预防措施及治疗方法。建立缺血动物模型是开展缺血性疾病研究的一种有效途径。通过对动物模型的在体研究,有助于阐明缺血性疾病的病变机制、发展过程,筛选出有特异性治疗作用的药物及方法。近年来,通过建立动物后肢缺血模型进行血管新生、基因疗法和干细胞移植等研究已成为现代生物医学领域中的研究热点。综合国内外研究资料可见,肢体缺血模型适用于急性缺血、慢性持续性缺血、肢体缺血再灌注以及缺血预处理等几方面的研究。因此,如何根据实验目的正确选择肢体缺血模型的制作方法,以及如何对该模型的缺血效果进行评价,从而制作出效果确实可靠、稳定性良好的肢体缺血模型显得尤为重要。有学者根据缺血效果将缺血动物模型总结为暂时缺血和永远缺血两大类,本研究现对这两类肢体缺血模型的建立、应用和评价作一总结,以期为该模型的相关研究应用提供参考。
模型制作
暂时缺血模型
暂时缺血模型包括肢体缺血再灌注损伤模型以及缺血预处理模型,适用于肢体缺血再灌注损伤的防治、肢体远距缺血预处理和肢体远距缺血后适应的研究。暂时缺血模型制作方法分为肢体环扎法和暂时阻断动脉法两种。肢体环扎法是外用绷带、止血带或橡皮筋等物质环扎于动物单侧或双侧肢体根部,一段时间后放开,以此达到暂时缺血的目的。环扎时间视研究目的而异,缺血再灌注损伤一般为4 h左右,而肢体缺血后适应或肢体远距预处理多为5 min,并反复多次进行。肢体环扎法具有无创性,对实验动物的损伤较小。暂时阻断动脉法通过手术分离实验动物某侧局部供血动脉,用血管夹暂时夹闭血流,3h(及以上)后撤夹恢复血流灌注,其效果比肢体环扎法可靠,但对实验动物的损伤较大。Messina 等将两种方法相结合使用,以加强肢体的急性缺血程度,其效果较单纯环扎或单纯夹闭血管要好。大体上看,暂时缺血模型的建立方法简便、易行,效果能够令人满意,基本上可以符合实验要求。