骨缺损模型
目前常用于制作骨缺损模型的动物有小鼠,大鼠,兔,犬,猪,羊等。
骨缺损动物模型理论上是选择越大型的动物越好,比如犬,猪,羊等。
一则越大型的动物骨折愈合机制与人类越相似;再则越大型的动物制作过程中越易于操作。大型动物也有实验成本过高,样本数量难以保证的现实缺点。
小鼠模型价格低廉,来源广泛,小鼠自身具有较强的抗感染及耐受手术的能力,且围手术期易于管理,因此小鼠模型具有一定优势。
一般小鼠选择2到3个月的小鼠作为模型,雌兔选择6到10个月的兔作为模型。
骨缺损模型骨缺损部位选择
骨缺损的部位可以划分为负重部位骨缺损与不负重部位骨缺损两类。
机械性骨损伤
机械性骨缺损可用于模拟创伤或手术导致部分骨受损或缺失的情况。
依据骨缺损的部位,机械性骨缺损主要有4种类型:颅骨缺损、长骨节段性缺损、部分皮质缺损和松质骨缺损模型。
1. 颅骨缺损模型
颅骨是研究原位骨愈合常用的手术部位之一,动物选小型啮齿类动物,如小鼠、大鼠。
造模举例:
通常选取成年雄性大鼠,盐suan氯an酮(40mg/kg)与盐酸甲苯噻嗪(8mg/kg)联合麻醉,也有采用10%水he氯醛(4ml/kg)腹腔注射麻醉。大鼠头颅备皮、消毒铺巾后,从鼻骨开始,沿颅骨矢状线取纵行手术切口,长约1.5~3cm,逐层分离软组织,充分显露矢状缝、双侧顶骨及部分额骨和枕骨。
根据圆形缺损直径大小的不同,在不同部位进行钻孔建模,直径≤6mm一般在双侧顶骨处钻孔;直径>6mm一般以矢状缝为中心进行钻孔。钻孔前需将骨膜充分剥离,将不同直径的空心钻头连接电钻后,低速(≤1500rpm)钻取,钻取过程中助手用生理盐水滴注(1滴/2s)降温。钻取时动作需轻柔(单纯凭借电钻的自然重力,尽量不附加外力),避免将骨组织全钻穿,接近钻穿时用剥离器沿着圆形缺损周边进行钝性分离,从而避免硬脑膜及其下方的血管、脑组织的损伤。生理盐水冲洗术野,探查无活动性出血后,用0号线逐层关闭皮下组织、皮肤切口。术后大鼠侧卧于30℃恒温台进行麻醉复苏,全清醒后送回饲养笼继续喂养,于术后8~12h,20~24h,32~36h分别予以丁丙nuo啡(0.05mg/kg)腹腔注射镇痛。
大鼠的种系一般选择SpragueDawley(SD)大鼠和Wistar大鼠,这两个品种的大鼠生长较快、繁殖能力强,容易饲养,对传染病的抵抗力较强。
通常采用成年的雄性大鼠进行动物实验,SD大鼠一般>12周(体重300~350g)。
大鼠颅骨中常用的临界骨缺损直径为5~8mm。一般认为,这种5mm骨缺损的优点是每只动物能诱发两个缺陷,避免跨越矢状缝。
颅骨缺损模型在研究中应用广泛,是可用组织学和放射学分析的标准化骨缺损,可用于评估骨组织工程生物材料之间的差异,缺点是无法评估生物材料在生理力学载荷下的性能。