一、小鼠肿瘤模型构建类型选择
| 模型类型 | 适用研究 | 周期 | 优缺点 |
|---|---|---|---|
| 移植瘤模型 | 药物筛选、免疫治疗 | 2-6周 | 操作简单，但微环境不完整 |
| 基因工程模型（GEMM） | 肿瘤发生机制、靶向治疗 | 3-12个月 | 自发成瘤，接近人类肿瘤但成本高 |
| 化学/物理诱导 | 环境致癌机制 | 2-6个月 | 多阶段成瘤，适合特定癌种（如肝癌、肺癌） |
二、小鼠肿瘤模型构建移植瘤模型（皮下/原位）
1. 细胞来源
细胞系：4T1（乳腺癌）、B16-F10（黑色素瘤）、HCT116（结肠癌）等。
患者来源异种移植（PDX）：将患者肿瘤组织移植至免疫缺陷鼠（NSG小鼠）。
2. 操作步骤（皮下移植）
细胞准备：
对数生长期细胞，胰mei消化后PBS重悬（活力＞90%）。
调整浓度：1×10⁶~1×10⁷ cells/mL（根据细胞类型调整）。
接种：
小鼠腋下或背部皮下注射100-200μL细胞悬液（27G针头）。
监测：
每2-3天测量肿瘤长径（L）和短径（W），体积公式：V = 0.5×L×W²。
终点：肿瘤体积≥1000mm³或出现溃疡。
3. 原位移植（以肝癌为例）
手术暴露肝脏：麻醉后左肋下切口，暴露肝左叶。
注射细胞：缓慢注入50μL HepG2细胞悬液（5×10⁵ cells）。
缝合监测：术后镇痛，4周后Micro-CT评估肿瘤负荷。
三、基因工程自发模型（以KPC胰腺癌模型为例）
1. 转基因小鼠
品系：LSL-Krasᴳ¹²ᴰ/+; Trp53ᴿ¹⁷²ᴴ/+; Pdx1-Cre（KPC模型）。
诱导：Cre重组酶激活突变基因，胰腺自发成瘤（8-12周）。
2. 监测
超声：检测胰腺肿块（≥3mm为阳性）。
血清标志物：CA19-9（胰腺癌）、AFP（肝癌）。
四、化学诱导模型（以DEN诱导肝癌为例）
Day 1：
14日龄小鼠腹腔注射二乙基亚硝胺（DEN，25 mg/kg）。
Week 6-8：
饲喂含0.05%二乙基己xi雌酚（DEN-promoter）饲料。
Week 20-30：
解剖观察肝肿瘤结节，计数并测量大小。
五、关键评估方法
1. 影像学
小动物超声：高频探头（≥30MHz）测肿瘤血流信号。
活体荧光成像（IVIS）：适用于荧光标记细胞（如Luciferase）。
2. 病理学
HE染色：评估肿瘤分化程度、坏死区域。
免疫组化：Ki67（增殖）、CD31（血管生成）、TUNEL（凋亡）。
3. 免疫微环境分析
流式细胞术：检测肿瘤浸润淋巴细胞（CD8+ T细胞、Treg）。
上一篇： 细胞基因编辑服务
下一篇：没有了
