烫伤感染动物模型
一、烫伤感染模型的定义与分类
1. 定义
烫伤感染模型是一种复合型动物模型，通过人为制造烫伤创面并接种病原菌，模拟临床烫伤后创面感染的病理过程。其核心目标是研究感染机制、评估抗感染药物及创面愈合策略。
烫伤基础定义：由无火焰高温液体（沸水、热油）、固体（热金属）或蒸汽导致的组织损伤，破坏皮肤屏障功能，增加病原体定植风险。
2. 分类依据
根据感染发生方式分为两类：
自发感染模型：烫伤后不主动接种病原菌，依赖环境微生物自然定植，模拟临床继发感染。
外源性感染模型：烫伤后立即接种特定病原菌（如金黄色pu萄球菌、铜绿假单胞菌），可控性强，用于机制研究。
烫伤深度分级（基于组织损伤程度）：
| 分级 | 病理特征 | 临床意义 |
|---|---|---|
| Ⅰ度 | 表皮红肿、疼痛，无水疱 | 轻微损伤，自愈快 |
| 浅Ⅱ度 | 表皮全层坏死，水疱形成，真皮浅层炎症 | 易感染，愈合时间中等 |
| 深Ⅱ度 | 真皮深层坏死，痛觉迟钝，基底苍白 | 高感染风险，易留瘢痕 |
| Ⅲ度 | 全层皮肤坏死，呈蜡白/碳化，干燥无弹性 | 需植皮，感染并发症率高 |
| Ⅳ度 | 深达肌肉/骨骼 | 罕见，多合并全身性感染 |
| 注：分级标准参考三度四分法。 |
二、动物模型选择与构建方法
1. 常用实验动物及特点
| 动物 | 优势 | 局限性 | 适用场景 |
|---|---|---|---|
| 小鼠 | 成本低、易操作、遗传背景清晰 | 皮肤薄，与人类差异较大 | 大规模药物筛选、机制初探 |
| 大鼠 | 体型适中，适合复杂操作（如休克复苏） | 皮肤结构与人类仍存差异 | 感染动力学、全身炎症反应研究 |
| 猪 | 皮肤结构（厚度、毛囊、代谢）与人类高度相似 | 成本高、饲养复杂 | 临床前治疗策略验证 |
| 兔/豚鼠 | 皮肤较厚，适用于深度烫伤模型 | 免疫反应差异需谨慎解读 | 创面修复与瘢痕形成研究 |
2. 模型构建的核心步骤
（1）烫伤创面制备
方法选择：
热水烫伤法：动物脱毛麻醉后，背部浸入恒温水浴（温度/时间因动物而异）：
大鼠：92℃水浸18秒 → Ⅲ度烫伤；100℃砝码压5秒 → 浅Ⅱ度。
小鼠：80℃水浸20秒 → Ⅲ度；55℃水浸20秒 → Ⅱ度。
热金属接触法：铜块/电烙铁预加热至80–100℃，垂直按压皮肤（时间控制深度）。
深度验证：48小时后组织学检查（HE染色），确认真皮坏死程度。
（2）病原菌接种
菌种选择：临床常见病原体如金黄色pu萄球菌（ATCC 25923）、铜绿假单胞菌。
接种方法：
刮擦法：创面轻微刮擦后滴注菌液（20μl，浓度1×10⁶–1×10⁸ CFU/mL）。
直接涂布：均匀涂布菌液于创面（大鼠：1ml菌液）。
优化浓度：小鼠模型验证显示1×10⁸ CFU/mL为最佳感染浓度（显著延迟愈合，P<0.01）。
（3）感染维持与监控
单笼饲养避免交叉感染，自由饮水饮食。
定期检测痂下细菌载量（>1×10⁵ CFU/g组织提示感染成立）。
三、烫伤感染动物模型评估指标
1. 感染特异性指标
细菌载量：
痂下组织定量培养（CFU/g）。
内脏（肝、肾、肺）细菌定植评估全身播散。
炎症反应：
局部：HE染色观察中性粒细胞/单核细胞浸润；ELISA检测创面促炎因子（IL-1β、IL-6、TNF-α）↑ 和抗炎因子（IL-10）↓。
全身：血清HMGB-1（损伤相关分子）、透明质酸↑，纤维连接蛋白↓。
2. 创面愈合指标
愈合时间：感染组愈合时间显著延长（小鼠：15.92±0.34天 → 21±0.95天）。
组织病理学：
光镜观察上皮再生、胶原排列、肉芽形成。
IHC染色检测凋亡标志物（如cC3上调）。
3. 全身并发症指标
死亡率：感染组5天存活率降至40%（对照组100%）。
血常规：白细胞总数↑（尤其粒细胞/单核细胞）
