olink蛋白组技术服务
一、核心原理:PEA 技术
1. 抗体对 + DNA 标签:每个目标蛋白对应一对抗体,分别偶联互补的单链 DNA(各带蛋白特异条形码)。
2. 双识别 + 邻位杂交:只有两个抗体同时结合同一蛋白,两条 DNA 才会靠近、杂交成双链。
3. 延伸 + 扩增 + 定量:DNA 聚合酶延伸→PCR 扩增→qPCR/NGS 读数;信号强度 = 蛋白浓度。
关键优势:非特异性结合不会让 DNA 靠近,几乎无背景,特异性可达 99.7%。
二、技术特点(为什么选 Olink?)
超微量:1–6 μL血清 / 血浆即可(比传统 ELISA 少 100 倍)。
超高灵敏:检测下限 fg/mL 级,能抓到极低丰度的细胞因子、信号蛋白Olink。
超宽动态:10 个数量级,同时覆盖高丰度(白蛋白)与低丰度(炎症因子)Olink。
高通量:一次可测 96–384 样本;蛋白数:Target(48/96)、Explore(384)、Reveal(~1000)。
高重现:CV <10%(板内)、<20%(板间),适合大队列(上万例)。
样本类型:血清、血浆、脑脊液、尿液、细胞上清、组织裂解液。
三、主流产品 Panel(怎么选?)
Target 96/48:qPCR 检测,48/96 蛋白,验证阶段、小队列、低预算。
Explore 384:NGS 检测,384 蛋白,覆盖炎症、免疫、肿瘤、代谢,常用。
Reveal(新品,2026):NGS,~1000 蛋白,全面炎症 / 免疫 + 疾病相关 + cis-pQTL 蛋白,发现级Olink。
Explore HT:超高通量,384 蛋白 ×384 样本,超大队列(如 UK Biobank)。
四、实验流程(5 步出结果)
1. 样本准备:血清 / 血浆,1 μL 足够。
2. PEA 反应:加抗体对→孵育结合→DNA 杂交延伸。
3. PCR 扩增:生成带条形码的扩增子。
4. NGS/qPCR 检测:测序或荧光定量,得到每个蛋白的读数。
5. 数据分析:标准化→差异蛋白→通路富集→ biomarker 筛选。
五、Olink vs 质谱(LC-MS)vs 传统 ELISA
Olink:靶向、超高灵敏、超微量、高通量、低 CV;适合血液 / 体液、大队列、低丰度蛋白。
LC-MS:无偏、全蛋白组、可发现新蛋白;但灵敏度低、CV 高、需大量样本;适合组织 / 细胞、发现阶段。
ELISA:单指标、低通量、高成本;适合少数指标验证。
一句话:Olink 是血液蛋白组的 “黄金标准",质谱是组织蛋白组的 “金标准",二者互补。
六、应用场景(适合做什么?)
疾病 Biomarker 筛选:肿瘤早筛、自身免疫病、神经退行性疾病(如阿尔茨海默病)、心血管病;AUC 可达 0.9+。
大队列流行病学:UK Biobank、中国慢性病队列,上万样本的蛋白组扫描Olink。
药物研发:靶点验证、药效监测、耐药机制、pQTL 研究(蛋白数量性状位点)Olink。
多组学整合:Olink(蛋白)+ 基因组 + 转录组 + 代谢组,构建疾病分子网络。
免疫与炎症研究:细胞因子、趋化因子、免疫检查点蛋白的原位 / 循环水平分析Olink。
olink蛋白组技术服务





