在现代生命科学研究中，科学家们常常需要同时分析成千上万个细胞的多种特性，如大小、内部结构和特定蛋白的表达水平。细胞流式检测（FlowCytometry）技术应运而生，它如同一台高速“细胞扫描仪”，让研究者能够精确、高通量地解析复杂的细胞群体。
🔬工作原理
流式细胞仪的工作流程可概括为“排队、照射、计数”：
单细胞悬液制备：通过酶消化、过滤等方法获得单细胞悬液，并去除细胞团块和杂质。
荧光标记：使用荧光染料或特异性抗体标记细胞。例如，用DAPI标记细胞核，用荧光抗体标记特定蛋白。
鞘流聚焦：细胞悬液在鞘液的包裹下，以单列形式通过检测区，确保逐个通过激光束。
信号采集：当细胞通过激光束时，会产生散射光（前向散射光FSC反映细胞大小，侧向散射光SSC反映细胞内部复杂度）和荧光信号。探测器将这些光信号转换为电信号。
数据分析：计算机软件根据信号的强度和分布，生成散点图和直方图，从而对细胞进行分群和定量分析。
🎯主要应用场景
免疫学研究：分析外周血、淋巴组织中各类免疫细胞（T细胞、B细胞、NK细胞等）的比例和功能状态。
肿瘤学：检测肿瘤细胞表面标志物，用于肿瘤分型、微小残留病（MRD）监测和免疫治疗疗效评估。
干细胞与发育生物学：鉴定和分选不同发育阶段的干细胞和祖细胞。
细胞周期与凋亡分析：通过特定染料评估细胞周期进程和细胞凋亡情况。
功能与药物筛选：研究药物对细胞增殖、凋亡、信号通路等的影响。
💡技术特点与发展
流式细胞术具有高通量、多参数、高速度和高精度的特点。近年来，随着技术的发展，流式细胞仪的性能不断提升：
多色分析：可同时检测十几种甚至几十种荧光信号，极大丰富了信息维度。
高参数流式：通过增加检测参数，更精细地解析细胞亚群。
质谱流式（CyTOF）：用金属同位素代替荧光染料，突破了荧光光谱重叠的限制，可实现上百个参数的检测。
成像流式：在获取散射光和荧光信号的同时，提供细胞图像，兼顾形态与功能信息。
