脑定位注射动物实验是一种在神经科学、药理学及疾病模型研究中广泛应用的精准操作技术，用于将药物、病毒载体、示踪剂、基因编辑工具（如CRISPR）或细胞等物质微量、定点地注入实验动物（通常为小鼠或大鼠）特定脑区，以研究神经环路功能、疾病机制或治疗策略。
该实验依赖立体定位仪（stereotaxic apparatus）实现高精度操作。首先，将麻醉后的动物固定于定位仪上，通过耳杆和门齿夹确保头部稳定；随后，依据标准脑图谱（如Paxinos&Watson图谱），结合颅骨表面标志（如前囟Bregma点），计算目标脑区的三维坐标（前后AP、左右ML、深浅DV）。接着，进行头皮切开、颅骨钻孔，将微量注射针（如33–35G不锈钢或玻璃毛细管）缓慢插入目标位置，通过微量注射泵以纳升至微升级流量（如100–500 nL/min）注入试剂，注射后留针数分钟以防止回流。
1、动物选择与适应
品种与年龄：根据实验目的选择合适动物（如小鼠、大鼠、兔等），并确保年龄、体重匹配，减少个体差异对结果的影响。
健康状态：实验前检查动物健康状况，排除感染、疾病或行为异常个体。
适应性饲养：提前将动物转移至实验环境，适应温度、光照、噪音等条件，减少应激反应。
2、麻醉与镇痛
麻醉剂选择：根据动物种类和手术时长选择麻醉方式（如吸入麻醉异f烷、注射麻醉戊巴b妥钠），确保深度麻醉且无疼痛反应。
麻醉监测：持续监测呼吸频率、心率、角膜反射等指标，避免麻醉过深或过浅。
术后镇痛：实验后根据疼痛程度给予镇痛药物（如布洛f、卡洛芬），减轻动物痛苦。
3、立体定位仪校准
坐标系统：使用标准脑图谱（如Paxinos&Watson大鼠脑图谱）确定注射靶点坐标（如前囟后、旁开、深度）。
仪器校准：实验前校准立体定位仪，确保三维移动精度（误差≤0.1mm），避免因仪器偏差导致定位错误。
