免疫荧光实验是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物，再用这种荧光抗体（或抗原）作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素，利用荧光显微镜观察标本，荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光（黄绿色或桔红色），可以看见荧光所在的细胞或组织，从而确定抗原或抗体的性质、定位，以及利用定量技术测定含量。
免疫荧光实验技术又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。
1、取出培养有细胞的盖玻片或glass-bottom培养皿，用0.01MPBS洗2-3遍。
2、加入0.3%的Tritonx-100,37℃,30rain
3、加入4%多聚甲醛试问固定30min或冷丙酮4℃固定10min。
4、正常阻断血清1:20封闭试问20-30min，抑制IgG的非特异性结合。阻断血清选择与二抗同一种属的正常血清。
5、去掉正常血清，直接加入一抗，37℃孵育1h或4℃过夜。抗体以0.01mo/LPBS稀释(理想的抗体浓度需经试验而定)。
6、0.3%TritonX-100洗5min，0.01mol/IPBS洗5min，0.3%TritonX5min，0.01MPBS洗5rain。
7、加入FITC-二抗或TRITC-二抗，37℃，孵育1h。
8、0.3%TritonX-100洗5rain，0.01mol/LPBS洗5min，0.3%TritonX5min，0.01mol/LPBS洗5min，用滤纸吸干。
9、90%甘油(PBS配制)封片。
10、激光扫描共焦显微镜下观察，或于4℃避光保存。
