细胞划痕服务是项目组成之一,该项目实验由经验丰富的人员进行操作。
细胞划痕服务本公司实验过程所用试剂,,已实验的准备性。
一、实验前准备
试剂:完q培养基、PBS、无血清培养基(可选)
耗材:6/12/24 孔板、10 μL 枪头、显微镜、相机
细胞:贴壁细胞,汇合度 70%~90%
二、实验步骤
1. 细胞铺板
将细胞接种到孔板中,培养至细胞铺满孔底 90%~100% 汇合(形成单层)。
2. 饥饿处理(可选,推荐)
吸去完q培养基,PBS 洗 1 次。
加入无血清 / 低血清培养基,饥饿 12–24 h,抑制增殖,只测迁移。
3. 划痕
用无菌 10 μL 枪头,在孔中y垂直、匀速、直线划一道痕。
每孔尽量保持划痕宽度、力度一致。
4. 洗去脱落细胞
吸掉旧培养基,PBS 洗 2–3 次,洗掉漂浮死细胞,只留下清晰划痕。
5. 加入培养基培养
加入无血清 / 低血清培养基。
放入培养箱,分别在 0 h、6 h、12 h、24 h、48 h 拍照。
6. 拍照记录
每孔固定相同位置、相同倍数拍照(一般 40×、100×)。
记录划痕宽度变化。
7. 数据分析
相关文章





