稳定细胞株筛选
稳定细胞株筛选实验原理外源基因在细胞中的表达可分为两大类,一类是瞬时表达,一类是稳定表达(又叫长久表达)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,虽然可以达到高水平的表达,但通常只持续几天。后者外源DNA整合到宿主细胞染色体上,使宿主细胞可长期表达目的基因。建立稳定细胞株,一般是根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的**对靶细胞进行筛选。常用的抗性标记基因有潮霉素(hygromycin)、新m素(neomycin)和嘌呤霉素(puromycin)。
实验流程1、载体构建(表达质粒载体、病毒载体);2、转染/感染;3、目的蛋白初步检测;4、***筛选;5、目的蛋白再次检测(定性/半定量);6、单克隆细胞株稳定性检测。四、 客户提供培养好的细胞五、 公司提供:基本实验步骤、图片、数据分析结果和稳定表达细胞株实验周期:大约3-4月左右,具体需要根据细胞实验内容而定。
相关文章





