自由基(free radicals),是指带不成对电子的原子、分子、离子或原子团。自由基的种类很多,如以氧(O)、碳(C)、氮(N)为中心的活性基团。活性氧族(reactive oxygen species, ROS)是生物体内一些氧化反应中形成的氧自由基,常见有超氧化阴离子(O2-),过氧化氢(H2O2),过氧化自由基(ROO-)和氢氧自由基(OH-)等形式。自由基外层具有非配对电子,其化学性质非常活泼,它既是电子供体,又是电子受体。
活性氧是细胞线粒体氧化呼吸中产生的自由基活性的物质,参与细胞多种生理和病理形成机制。检测细胞ROS的含量,可以了解ROS在细胞一些生理和病理状态中的变化,分析药物效应和相关机制。
活性氧检测试剂盒是利用ROS荧光探针-DCFH-DA进行活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA本身没有荧光,可自由透过活细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以知道细胞内的活性氧水平。根据活细胞中红色荧光的产生,可以判断细胞ROS含量的多少和变化。
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