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细胞克隆

细胞克隆

简要描述:
品牌自营品牌产地类别国产
应用领域医疗卫生,化工,生物产业
细胞克隆:软琼脂克隆,克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。细胞包克隆化其他方法 1.稀释铺板方法 2.饲养层克隆法 3.毛细管克隆法 4.荧光激活分选法。

更新时间:2023-10-30

访问量:1258

厂商性质:其他

软琼脂克隆:克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状
实验步骤
1.获取样本,培养细胞,
2.调整细胞悬液密度为1x103个/ml细胞。
3.制备底层琼脂,*溶化的5%琼脂和37*C左右预温的新鲜*培养液以1: 9比例在40^C均匀混合,加入培养皿(直
径60mm)中,每皿含0.5%琼脂培养基2ml,室温下琼脂*凝固。
4.制备上层琼脂,37C密度每皿含200个的细胞悬液1.5m移入小烧杯中,加入40C、5%琼脂等体积混匀,即成0.25%半固
体琼脂培养基。配好的半固体琼脂培养基立即加入铺有底层琼脂的培养皿中,室温下琼脂凝固。37C、5%CO2静置培养2-
3周。
5.当培养皿中出现肉眼可见克隆时,终止培养,弃去培养液,PBS液小心浸洗2次,空气干燥。甲醇固定15分钟,弃甲醇后
空气干燥。用Giemsa染液染色10分钟,流水缓慢洗去染液,空气干燥。

 实验周期及交付标准
1.实验周期: 1-2周
2.交付标准:克隆形成图片、计数结果、柱状图、实验报告(实验步骤、试剂、仪器等)
细胞包克隆化其他方法
1.稀释铺板方法
2.饲养层克隆法
3.毛细管克隆法
4.荧光激活分选法

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