TUNEL染色服务
简单介绍:
TUNEL染色服务即原位末端转移酶标记技术,是分子生物学与形态学相结合的研究方法。具体而言,当凋亡细胞的DNA双链断裂或一条链出现缺口时,会产生一系列3’-OH末端。在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和sehngwusu或荧光素(FITC)所形成的衍生物标记到DNA的3′末端,从而进行凋亡细胞的检测。
基本原理:
其原理是荧光素(fluorescein)标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT Enzyme)的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂DNA的3’-OH末端,并与连接辣根过氧化物酶(HRP,horse-radish peroxidase)的荧光素抗体特异性结合,后者又与HRP第五二氨基联苯胺(DAB)反应产生很强的颜色反应(呈深棕色),特异准确地定位正在凋亡的细胞,因而在光学显微镜下即可观察凋亡细胞。由于正常的或正在增值的细胞几乎没有DNA断裂,因而没有3’-OH形成,很少能够被染色。TUNEL细胞凋亡试剂盒适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片)在单细胞水平上的凋亡原位检测。
特点:
1、高灵敏度:可以在单细胞水平检测到细胞凋亡,同时由于凋亡早期就有DNA断裂,可以检测到早期的细胞凋亡。
2、特异性好:TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞,而不容易标记坏死细胞。
3、快速:实验流程可以在较短时间内完成。
4、应用范围广:可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
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