尼氏染色实验技术:
Franna Nissl (1860-1919) 1892年创立了Nissl染色法,以发现Nissl小体和Nissl变性而闻名。常用的碱性染料有Cresyl violet (焦油紫,甲酚紫,克紫) ;thionine (硫堇) ;tolridine blue (甲苯胺蓝)等。
尼氏体为嗜碱性物质,又称嗜染质,光镜下呈斑块状或细粒状散在均匀分布。 在一些大型的运动神经元 ,尼氏体大而多,宛如虎皮花纹,又称“虎斑”。电镜下,尼氏体由大量平行排列的粗面内质网和其间的游离核糖体组成。尼氏体是神经元胞体细胞质的特征性结构之一,神经元胞质另外 一特征性结构为神经原纤维。
尼氏染色实验技术原理:
正常的神经细胞都含有一定数量的尼氏体,它们主要分布于神经细胞的浆中,形状有大有小,如三角形,有的为椭圆形。这些物质能被大部分的蓝色染料所染色,这些染料如焦油坚牢紫( CresyI fast violet )、亚甲蓝( methylene blue )、甲苯胺蓝( toluidine blue )、硫堇( thionin )等钭其染为蓝色。但是,当神经细胞受伤后,胞质内的尼氏体更可发生变化,严重的可消失。
实验操作流程:
1、切片脱蜡至水;
2、用焦油坚牢柴水溶液浸染20-30分钟
3、水洗;
4、用95%酒精分化;
5、*脱水,二甲苯适明,中性树胶。